サービス概要

テンプレートとプライマーを混合した状態のサンプルをお送りいただくことで、より安価に弊社のシーケンスサービスをご利用いただけます。

Premixシーケンスのウェブオーダー方法
8連チューブ、シングルチューブでお送りいただく場合はこちら
プレートでお送りいただく場合はこちら

納期

サンプル受付後、最短12時間、通常24～36時間、48時間以内の納品を保証いたします。
*土日休日を除きます。
* 大量サンプルをご依頼時の納期は別途ご相談ください。

価格

60反応未満の場合
1反応あたり605円（税込）
*8反応以上の場合は送料無料です。着払いにてお送りください。
* 8反応未満で着払いにてお送り頂いた場合、送料実費を請求いたします 。

60反応以上の場合（シングルチューブは対象外）
35,904円（税込）
*60-96反応一律価格
*シングルチューブでお送りいただいた場合、こちらの価格は適用外です。96 well プレート もしくは 8連チューブ でお送りください。
*送料無料です。着払いでお送りください。
*97反応以上の価格はお問い合わせください。
　Mail : ces@macrogen-japan.co.jp

注意事項

• 一般シーケンスで行っている品質チェックはいたしません。お送り頂いたサンプルをそのまま 、BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit を用いたシーケンス反応に使用します。
• シーケンス長・品質の保証はいたしかねます。
• 弊社の機械トラブル等による結果不良を除き再反応をいたしかねます。

サンプル準備

下表の条件を参考に、テンプレートとプライマーの混合物をご調整ください。

*3 kb 以上のPCR産物はご注文登録の際、“付記事項（コメント欄）”にサイズの記入をお願いします。

• プレートの場合はシールではなく、可能な限り8連チューブの蓋をご利用ください。
  *シールをご利用の場合はプレート底部にサンプルを集め、予め凍らせた状態で冷凍便にてお送りください。
• シングルチューブ、8連チューブの場合は、特に輸送温度の指定はございません。DNAの分解がご不安でしたら冷蔵便・冷凍便でお送りください。

サービス概要

お客様にシーケンス反応、シーケンス反応物の精製、Hi-Di Formamideへの溶解まで行っていただき、弊社でランのみを行うことで、さらに安価にシーケンスサービスをご利用いただけます。

Run Onlyシーケンスのウェブオーダー方法はこちら

納期

サンプル受付後、最短12時間、通常24～36時間、48時間以内の納品を保証いたします。
*土日休日を除きます。
* 大量サンプルをご依頼時の納期は別途ご相談ください。

価格

65反応未満の場合
1反応あたり363円（税込）
*16反応以上の場合は送料無料です。着払いにてお送りください。
*16反応未満で着払いにてお送りいただいた場合は送料実費も請求いたします。

65反応以上の場合
23,232円（税込）
*65-96反応一律価格
*送料無料です。着払いでお送りください。
*97 反応以上の価格はお問い合わせください。
Mail　:　ces@macrogen-japan.co.jp

注意事項

• Run Only シーケンスでは一般シーケンスで行っているサンプルの品質チェックはいたしません。お送り頂いたサンプルを、そのままシーケンサーでRunいたします。
• Run Onlyシーケンスでは、サイクルシーケンス反応まで行われたサンプルをお預かりするため、シーケンス長・品質は保証いたしかねます。
• Run Onlyシーケンスでは、弊社の機械トラブル等による結果不良を除き、再反応をいたしかねますことを、予めご了承ください。

サンプル条件

• サンプルは1反応につき 15 μL以上 の溶液量でご用意ください。
• サイクルPCR（シーケンス反応）はBigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit を用いて行ってください。
• サンプルはシーケンス反応後、精製、Hi-Di Formamide に溶解してください。
• 8連チューブ、96ウェルプレートのいずれかの容器にてお送りください。
• アルミホイル等で遮光の上、冷凍便でお送りください。

※ サンプルの品質チェックはいたしません。お送り頂いたサンプルを、そのままシーケンス解析いたします。

サービス概要

長鎖の未知のDNA配列を解析するのに適した解析です。お送りいただいたテンプレートDNAとプライマーで初回のシーケンス反応を行います。そこから得られた配列情報を元に、ご希望のウォーキングサイズまでプライマー製作およびシーケンス反応を繰り返し行います。そして、それぞれの反応から得られた配列のアセンブル結果をご報告いたします。

解析の流れ・納期

初回シーケンスは一般シーケンスと同様に行い、その後、シーケンスを読み進めるごとに新たなプライマーを設計・製作いたします。下図の通り、Forward側またはReverse側の一方向から読み進める場合と、両方向から読み進める場合がございます。

納期は、ご希望のウォーキングサイズによって異なりますが、およそ4,000 bpを片側から読み進める場合で1か月程度でございます。

*シーケンス不良などによりプライマー製作が困難となり、テンプレートDNAの全長がシーケンス出来ない場合もございます。何卒ご了承くださいませ。

価格

初回1反応: 935円（税込）*1
2反応以降: 5,500円/反応（税込）*2

*1 お送りいただいたプライマーもしくは弊社保有のUniversal Primerを使用して初回シーケンスを行う場合の価格です（一般シーケンスと同様）。弊社でプライマー製作から行う場合、製作費用（121円 / mer）も頂戴いたします。

*2 Primer Walkingでの2反応目以降における 『1反応』 について初回1反応 (約 1,000 bp) の解析を行い、その後プライマーの設計箇所に関わらず、 500 bpずつシーケンスを読み進める毎に 『1反応』 とカウントいたします (500 bp未満は切り上げいたします)。そのため、Primer Walkingにおける反応数は、実際に設計を行ったプライマーの数と一致しない場合がございます。なお、2反応目以降のプライマー製作費用は、上記の価格に含まれております。

例) 決定したい配列長 4,000 bp
　【パターン1】Forward側 または Reverse側 の一方向から読み進める
　初回 (約 1,000 bp) 1反応 ＋ プライマーウォーク (500 bp) 6反応
　 935円 ＋ (5,500円 ×6反応) ＝ 33,935円（税込）

　【パターン2】Forward側 および Reverse側 の両方向から読み進める
　初回 (約 1,000 bp) ２反応 ＋プライマーウォーク (500 bp) 4反応
　（935円 ×2反応）＋（5,500円 × 4反応） ＝ 23,870円（税込）

サンプル条件

プラスミド： 100ng/ul 以上
PCR産物：50ng/ul 以上
※未精製PCR産物も同条件となります。
※1.5ml チューブ のご使用をお勧めいたします。
※規定濃度に満たない場合でもシーケンスは可能ですが、結果の保証はいたしかねます。

基本10 uL + (3 uL × プライマーウォーク 反応回数分）

*プラスミド・PCR産物 いずれも上記の容量でご準備ください。1反応で500 bpシーケンスする想定でご準備ください。

例) 決定したい配列長 4,000 bp
　【パターン1】Forward側 または Reverse側 の一方向から読み進める
　基本10 uL + (3 uL × 6反応）= 28 uL

　【パターン2】Forward側 および Reverse側 の両方向から読み進める
　 基本10 uL + (3 uL ×4反応）= 25 uL
　*初回シーケンスでは1,000 bpのシーケンスを想定しています。

以下のリンクに記載のある弊社保有のUniversal Primerは無料でご利用いただけます。ウェブオーダー時のプライマータイプ欄にて【ユニバーサル】をお選びください。

基本濃度
5 pmol/uL (5 uM)
*5 pmol/uL 未満のプライマーでも解析は可能ですが、結果の保証はいたしかねます。

溶液量
10 uL(5 uM、1反応のみの場合) をご用意ください。

複数のテンプレートDNAを1種類のプライマーで解析する場合、1反応につき2 uLを追加してください。
例) テンプレートDNA 4種類の場合
　基本10 uL + (2 uL ×3反応）= 16 uL

*テンプレートDNAとプライマーは混合せず、必ず別々の1.5mLチューブでお送りください。
*弊社サービスの推奨プライマーTm値は 50～58℃ です。

ウェブオーダー時のプライマータイプ欄にて【製作】をお選びいただき、プライマーの配列をご入力ください。
製作したプライマーは最終ご利用日から6カ月保管いたします。6か月の期間内であれば保管プライマーとしてご利用いただけます。
保管プライマーのリストに表示されない場合は、付記事項欄に使用を希望する製作済プライマー名を記載ください。

サービス概要

「PCR & Sequence」サービスでは、手間や時間のかかるPCR増幅・増幅産物の確認/精製・サンガーシーケンス解析までの一連の解析作業を実施するサービスをご提供いたします。ご注文の際に「抽出済みgDNAサンプル」「プライマー」および「PCR条件(情報)」をご提供ください。弊社のUniversal primer list に記載のあるプライマーは無料でご利用いただけます。 gDNA抽出からも有償オプションで対応をいたしますので事前にお問い合わせください。

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特徴/サービス内容

◆ご注文の際に下記のサンプル 　および情報をお知らせください。 ・サンプル（gDNA） ・プライマー（PCR増幅用、シーケンス用） ・PCRサイクル条件 　※gDNA抽出からも対応 (有償) をいたします。事前にお問い合わせください。 　※プライマー配列情報を頂ければ、弊社でプライマー製作(有償)も対応いたします。 ◆PCR増幅は、お客様よりご提供頂くPCRサイクル条件情報に従い実施いたします。 　※PCR産物サイズ：500 ~ 3,000bpでの設定をお願いします。 　　これ以外のサイズの場合には、事前にご相談ください。 ◆電気泳動によるPCR産物の確認において、　 　下記の場合実験を終了することがございます。 　・目的のサイズのPCR産物の増幅が確認できない場合 　・目的のサイズのPCR産物の増幅が確認できるが他にもエキストラバンドが 　　確認される場合 　※PCR増幅結果が不良の場合、DNA濃度を変えるなど、2回までは再PCR増幅を 　　実施いたします。 　※PCR増幅までで実験を終了する場合、実施したところまでの作業費用を 　　ご請求いたします。 ◆PCR産物をテンプレートに使用したサンガーシーケンスを実施し配列情報を取得します。

弊社保有のUniversal primerは無料でご利用いただけます
プライマーリストはこちら

納期

＊標準的には、サンプル到着/受付完了後、10営業日で結果報告(*1,*2)

＊プライマー製作からご依頼いただいた場合上記の基本納期 + 2営業日をいただきます。

(*1) 一度のご注文あたり 5領域以上の解析の場合、10営業日よりお時間を頂戴する場合がございます。事前にご相談ください。
(*2) サンプルが午後到着の場合、翌日の受付になる場合がございます。

価格

1領域あたり、7,700円(税込)

＊一度にお送りいただけるサンプル数に応じて価格を調整いたします。お気軽にお問い合わせください。
＊ サンプル送料は弊社が負担いたしますので着払いでお送りください。元払いの場合、送料の負担は致しかねます。

＊PCR増幅結果が不良の場合、DNA濃度を変えるなど2回までは再PCR増幅を実施いたします。
　再PCR増幅結果でも改善が見られない場合は、その時点で解析を終了する場合がございます。
　PCR増幅までで実験を終了した場合、実施したところまでの作業費用をご請求いたします。

＊サンガーシーケンスにおいて、良好な結果が得られなかった場合には、追加費用なしで再シーケンスをいたします。
　再シーケンスの結果において、改善が見られない場合は、その時点で解析を終了する場合がございます。
　サンプルの状態によってはシーケンス結果を得られない場合もございます。サンガーシーケンスまで実施した場合
　解析費用は全額請求となりますので、あらかじめご了承ください。

付加サービス
＊ gDNA抽出からも有償オプションで対応をいたします。事前にご相談ください。
＊プライマー製作　121円（税込）/ mer
　※オーダー完了後にご注文をキャンセルされた場合でも、プライマー製作費用が発生する場合がございます。
＊ シーケンス結果を使用したBLAST検索にも対応をいたします。事前にご相談ください。

解析結果

＊シーケンス結果は ab1, txt, pdf, phd, scf の5種類のファイル形式で納品いたします。
　シーケンス完了後、ご登録のメールアドレスへ結果ファイルのダウンロード用URLをお送りいたします。
　お客様専用のマイページからのWeb上での結果ファイルダウンロードも可能です。

＊結果は1か月以内にダウンロードをお願いいたします。納品から1か月経過しますとデータを削除いたします。

＊お送り頂くサンプル、プライマーの保管期間は結果納品より1か月間です。

サンプル準備

抽出済みDNAでお送り頂く場合
＊サンプル濃度/容量：1サンプル1領域解析あたり5ng/uL以上、基本容量 20uL 以上
＊1サンプル（同一サンプル）において、解析が1領域増えるごとに、+10uL を追加でお送りください。
　例：1サンプルで3領域を解析する場合、基本20uL + (10uL x2領域）=40uL

＊ご提供頂くサンプルは必ずオリジナルから分けたサンプルをお送りください。
　オリジナルサンプルは必ずお客様のお手元で保管ください。
＊解析完了後サンプルのご返却をご希望の場合、事前にお問い合わせください。
＊お客様よりお送り頂いたサンプルの保管期間はご利用頂いた案件の納品日より1カ月間です。

その他のサンプルでお送り頂く場合
＊ gDNA抽出からも対応をいたします。事前にご連絡ください。
サンプルについては、組織、細胞、血液、細菌類などが受入可能です。

　※ヒトへの感染性/病原性を有する可能性のある菌株の場合、抽出はお受けできません。
　　その場合、抽出済みDNAの状態でお送りください。

プライマー準備

＊プライマーは必ずオリジナルから分けたプライマーをお送りください。
　オリジナルプライマーは必ずお客様のお手元で保管ください。
＊プライマーをお送り頂く場合
　プライマー濃度/容量は、1サンプル1領域解析あたり 10pmol/uL(10 uM)以上、基本20uL 以上をお送りください。
　　※PCR増幅、サンガーシーケンスに使用するプライマーを含みます。
　　　サンプルが増えるごとに、+20uL を追加でお送りください。
　　　　例：4サンプルのそれぞれにおいて、同じ領域を解析する場合、基本20uL + (20uL x3領域）=80uL

＊プライマーをMacrogenJapanで製作する場合
　合成費用： 121円（税込）/ merが別途生じます。
　　※製作プライマーのご返却をご希望の場合、事前にお問い合わせください。

弊社ユニバーサルプライマーをご利用頂く場合
以下のリンクに記載のある弊社保有のUniversal Primerは無料でご利用いただけます。ウェブオーダー時のプライマータイプ欄にて【ユニバーサル】をお選びください。

保管プライマーをご利用いただく場合
「保管プライマー」の保管期間は、直近でご依頼いただいた受託のサンプル到着後の受付日より1か月間です。
保管期間内であれば、新規受託登録において「保管プライマー」をご利用いただけます。
ウェブオーダー時のプライマータイプ欄にて【保管】をお選びください。

*残量が無い場合はオーダー確認後、メールにてご連絡いたします。
*新規受託登録が保管期間内の場合でも、サンプルの弊社到着が保管期間経過後の場合、「保管プライマー」がご利用頂けない場合がございます。 受託登録・サンプル発送は、保管期間に余裕をもって行っていただきますようお願いいたします。

弊社でプライマーを製作する場合
ウェブオーダー時のプライマータイプ欄にて【製作】をお選びいただき、プライマーの配列をご入力ください。
製作したプライマーは弊社にて6か月間保管いたします。6か月の期間内であれば保管プライマーとしてご利用いただけます。

PCR条件について

*弊社既定の書式に当てはまらないような特殊なPCR条件の場合は、事前にご相談ください。